1.BEAS-2B细胞背景
BEAS-2B细胞是从肺癌个体的正常人支气管上皮病理切片分离出的上皮细胞。这个细胞引种自ATCCCRL-，又可被称为支气管上皮细胞。BEAS-2B细胞系最初是通过使用腺病*12-SV40杂交病*感染，并通过连续细胞传代建立的永生化细胞系，它保留了对血清反应进行鳞关分化的能力，这种能力可用于筛选诱导或影响分化及致癌的化学或生物制剂，因此BEAS-2B细胞被认为是研究药物代谢活化作用和呼吸系统肿瘤以及分子机制理想的细胞模型。
2.BEAS-2B的应用
BEAS-2B细胞在成骨和成脂分化方面与hMSCs具有相似的潜力
将细胞分化诱导21天后，用油红染色分化脂肪细胞中的脂质液泡，然后使用茜素红染色分化骨细胞中的钙沉积。结果表明BEAS-2B和在成骨发生或脂肪发生方面均显示出几乎相同的阳性染色，这说明BEAS-2B细胞能像hMSC1细胞一样能在诱导后表现出很强的骨细胞和脂肪细胞分化能力。
BEAS-2B可用于筛选化学和生物制剂诱导。
目前，BEAS-2B已被广泛用于研究肺癌发生的细胞和分子机制，其中包括上皮间质转化（EMT）在肺癌和肺炎球菌感染中的作用等。此外，BEAS-2B细胞系已被用作体外细胞模型，用于检测和筛选具有潜在肺*性或肺部致癌性的各种化学和生物制剂。
3.使用CRISPR-U在BEAS-2B细胞中实现基因编辑
基因编辑和细胞模型的建立对于推进功能基因组学、信号通路、新陈代谢、细胞死亡、药物发现、药物反应和癌症研究等领域具有重要的意义。BEAS-2B细胞作为研究药物代谢活化作用和呼吸系统肿瘤以及分子机制的理想细胞模型，已经有许多研究人员利用CRISPR/Cas9技术对其进行编辑以研究癌症特征、耐药机制的披露、癌症治疗、细胞死亡研究、功能基因组学、信号通路、药物发现、药物反应和细胞治疗等多种具有重要意义的课题。源井生物研发的CRISPR-U（基于CRISPR/Cas9技术）在DNA双链的切割上比一般的CRISPR/Cas9系统更有效率，不仅可以显著提高同源重组的效率，还能同时在体内外实现高效的基因编辑，对于BEAS-2B细胞的基因编辑实验有着极大的优势。
图1使用CRISPR-U在BEAS-2B细胞中基因编辑过程
3.1CRISPR-U基因敲除BEAS-2B细胞系通过病*转导、脂质体转染或核转移将gRNA和Cas9转移到细胞中，然后通过药物筛查后，产生单克隆，最终阳性克隆将通过测序进行验证。具体案例如下：
图2BEAS-2B细胞系的敲除策略
P53基因是氡照射致BEAS-2B细胞恶性转化中的重要影响因素。在人正常肺上皮细胞（BEAS-2B）中敲除P53基因，并对基因敲除后的BEAS-2B细胞和正常BEAS-2B细胞分别进行氡染*处理。研究人员发现，BEAS-2B细胞敲除P53基因后氡照射的BEAS-2B细胞更早地出现了恶性转化。相较于BEAS-2B细胞染氡组(2B-Rn)，P53基因敲除的BEAS-2B细胞染氡组(P53KO-Rn)增殖速度更快（P0.05），形成克隆的时间更早（P0.05），侵袭力更强（P0.05），上皮-间质转化（EMT）相关基因mRNA表达水平变化也更早（P0.05）。结果表明，氡照射导致BEAS-2B细胞发生恶性转化，并且P53在氡气致肺癌中具有重要作用。
参考：